VersaFluor Fluorometer快速操作指南
信息来源: 时间:2015-07-17 点击次数:
.一般流程指南
一个典型的样品检测需要五步:
注意:仪器在进行读板前需要预热至少20min。
1.选择并插入两个光学滤光片。
在VersaFluor Fluorometer中插入激发光和发射光滤光片。
2.设置Gain
在主菜单上点击SETUP按钮,重新设置LOW,MED或HIGH。
3.仪器归零
点击RANGE按钮,设置范围到00000。调解范围到00000,点击EXIT。把基线样品比色杯放入仪器的比色杯室中,点击SET ZERO按钮。荧光显示为0±5。如果不是此范围,点击SET ZERO按钮再次归零。
4.设置范围
设置范围时先将含有最高浓度标准液的比色杯放入比色杯室中,关上舱门盖。大约等10秒钟,使仪器调整好光的条件。点击RANGE按钮。调整参数为需要的范围设置。最大设置为19,999RFU,点击EXIT。
5.检测样品
把装有样品的比色杯放入比色杯室中,关上舱门盖子。等待10秒,使仪器调整好光的条件。记录或打印RFU值。把剩下的样品读取完。
仪器参数的设置
1.仪器必须在使用前预热20分钟。如果仪器没有充分预热,数据的重复性可能不好。
2.选择激发光和发射光率光片,并将它们插入滤光片架上。调整滤光片的方向,使滤光片架上有缺口的凹槽对着比色杯架。
注意:对检测样品来说需要仔细考虑使用的滤光片的波长。如果使用了不正确波长的滤光片将大大的降低荧光检测的正确性。
3.点击在主菜单中的SETUP按钮来对Print Averaging和Gain进行设置。
4.点击AVRG选择打印平均时间(1,2或4秒)。
5.点击GAIN来选择Gain设置(LOW,MED或HIGH)。然后点击EXIT返回主菜单。
6.为任意比色杯增加标准,未知和空白设置。
7.严格按下面的样品检测指南来确保结果的正确性:
仪器至少预热20分钟;
经常校正移液器以确保移液的正确;
用移液枪彻底混匀标准品和样品;
除掉比色杯内的所有气泡;
拿比色杯时要拿其最上面的边缘,因为比色杯的四个光学面要保持干净;
用无绒材料来擦拭比色杯面;
在室温下读取所有标准品和样品的值;
在读取数值时,把样品放置于仪器中,这样可降低样品的光淬灭。
设置标准曲线
可用已知的标准品和荧光染料来设置仪器的范围。同时也取决于所用流程中需要单点还是多点曲线。
1.点击RANGE按钮,调节仪器范围为00000,然后点击EXIT。
2.仪器归零,把基线(空白)比色杯放入比色杯室中,关上舱门盖子。等大约10秒,使仪器调整光的条件。点击SET ZERO按钮;当闪烁停止时,读取屏幕显示的荧光值。如果显示为0±5,仪器归零完成。如果不是,则点击SET ZERO按钮重新归零。
3.设置仪器的范围,把含最高浓度的标准液的比色杯防于比色杯室中,关上舱门盖子。点击RANGE按钮,调节至所需的范围。最大设置为19999RFU。点击EXIT。荧光显示器将读取舍之范围值。 读取或打印RFU值。拿掉最高浓度标准比色杯。
4.对于多个标准样品,读取剩余的样品。等大概10秒钟使仪器调整光源条件。读取或打印荧光屏的RFU值。荧光屏上显示的数值是基线样品和最高浓度标准之间的差值。
注意:荧光的检测可以持续的进行。除非基线条件改变,在每次检测之前无需仪器调零。在Gain设置切换时用基线液(空白)检查调零。
读取未知样品数值
1.把装有未知样品液的比色杯放入比色杯室中并关闭样品舱门盖子。等待大概10秒使仪器调整好光源条件。读取或打印RFU值。
2.读取剩余样品。
注意:荧光的检测可以持续的进行。除非基线条件改变,在每次检测之前无需仪器调零。在Gain设置切换时用基线液(空白)检查调零。
3.样品浓度可以通过与标准曲线比对RFU来确定。



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