Mini Protean tetra cell快速操作指南
信息来源: 时间:2015-07-10 点击次数:

1.将短玻璃板放在带有边条的长玻璃板上,做成玻璃板夹心
2.将玻璃夹心放入灌胶架,短玻璃板冲前。两块玻璃板底部齐平
3.锁紧夹子(绿色),夹紧玻璃板夹心,做成灌胶模块
4.把灰色的橡胶垫放在灌胶架底部,将灌胶模块放在灰色的胶垫上,灌胶架上部有一透明夹子,用此夹子夹住长玻璃板
5.灌入新鲜配置好的凝胶溶液(无须任何封边),如用梳子,水平放好梳子
常用聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配方见下:

6.凝胶凝固后,取出梳子,加入准备好的样品。把
玻璃板夹心(凝胶)从灌胶架上取下
7.把玻板夹打开,放在干净的平台上。

8.把第一块胶三明治结构(短板朝内)放置于胶支
架上,以30度角倾斜放置。以同样方法把第二块
三明治结构放在玻板夹的另一面。如果跑奇数块
胶,则在另一边放置缓冲液挡板。
9.用一只手把两块三明治结构相向的朝水平方向推
到一起,使其紧密的和绿色的垫圈相接。短板朝内
并使其刚好位于绿色垫圈凹槽下。
10.用另一只手轻柔的朝绿色垫圈方向挤压三明治结
构,用绿色夹子夹住三明治结构。也可用手同时进
行此步操作。
11.将装配好的电泳架放入电泳槽内。如果大于两块
胶,则按上面方法安装另一块电泳架。
12.在电泳槽内槽加入缓冲液,使液面刚好低于外板边缘,然后上样。
13.在电泳槽中加入缓冲液,两块胶系统需要550ml,四块胶系统需要680ml。本系统有两个电泳架位置,Electrode Assembly(后方位置)和Companion Running Module(前方位置)。在正确放置电泳槽时,电泳槽内部边缘顶端的红色标记位于人的右边,黑色标记位于左边。
14.盖上电泳槽的盖子,将电泳槽电极(无论是两胶系统还是三胶系统均位于后方)和电泳仪相连接,正极对正极,负极对负极(红对红,黑对黑)。
15.在电泳仪上设定电泳电压或电流,开始电泳。一般SDS-PAGE可用200V恒压,大约35min能完成电泳。也可用低电压如120V等,时间较长但效果更好。具体条件根据样品摸索。
16.电泳完成后,关闭电泳仪,拔出电极线。
17.打开盖子,取出电泳模块,打开密封夹,取出玻璃板(凝胶)。
18.轻轻用撬胶板(绿色)撬开玻璃板,让凝胶滑入缓冲液或蒸馏水中。
19.清洗电泳槽,玻璃板。



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